Uma problema que tive logo que comecei a trabalhar com biologia molecular e que recentemente em conversa com uma aluna de mestrado, me voltou a memória, é a concentração de DNA que o nanodrop te dá. No começo me lembro que só de ver uma número alto, por exemplo 900 ng/ml, eu ficava super contente,…
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Real-Time PCR (RT-PCR) versus PCR
Conceitos resumidos para o alcance da compreensão Uma das principais diferenças de um Real-Time PCR e um PCR convencional é a fita molde utilizada, no primeiro processo utilizamos basicamente o RNA que necessita ser transformado em cDNA para então iniciar o PCR propriamente dito. Outra diferença entre os dois processos, é que o RT-PCR é…
Desenho de primers
Processo pré-desenho de primers Antes de iniciar o desenho de primers é necessário verificar algumas informações básicas, como: Tamanho em pares de base do gene alvo Região codificante do gene alvo (CDS) Quantidade de sequências depositadas em banco de dados (ex. GenBank) e tamanho das mesmas, verificar sequências que são predicted. NOTA: Para maiores informações…